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溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis ，UC）是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病 ，其病因尚不明确 ，现在被天下卫生组织（WHO）列为“现代难治病”。西医关于本病的药物治疗手段主要为激素、免疫系统调理剂等 ，但恒久服用对肝、肾毒性较大 ，并可导致机体免疫力低下。从中医的角度来看 ，UC属于“痢疾”“泄泻”“便血”等领域 ，随着病情生长还会泛起诸如由虚转实、由寒转热 ，或虚中夹实、寒热庞杂等病机的转化。《溃疡性结肠炎中医诊疗专家共识意见（2017)》凭证其重大多样的病因病机对UC举行了辨证分型 ，针对差别证型UC的辨证论治更切合对该病的中医治疗战略。在与UC相关的动物实验研究中 ，最常用的化学造模诱导剂包括2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）和葡聚糖硫酸钠（DSS）。上述造模方法仅可建设动物的结肠炎症模子 ，但切合中医证候特点的UC动物模子建设要领的报道较少。 在现有与上述证型相关的研究中 ，多涉及湿热蕴结证、脾虚湿困证和肝郁脾虚证等 ，而关于寒热庞杂证型UC模子的研究较少。“寒热庞杂证”是一种机体同时泛起寒象与热象的证候 ，寒热庞杂型UC既常见于单独证型 ，又展现了UC疾病自己的错综重大 ，且UC的总病机与寒热庞杂、气滞血瘀相关。对“寒热庞杂型UC”这一主要分型的研究现状 ，限制了该分型UC的病因病机、中药药效和中医治疗手段的研究 ，故基于病证团结特点 ，细化寒热庞杂型UC动物模子的相关操作 ，将有利于相关的辨病剖析与辨证研究。 乌梅丸是《伤寒论》中治疗基本病机为“寒热庞杂 ，上热下寒”厥阴病的中药方剂。有研究显示 ，乌梅丸对大承气汤与TNBS/乙醇混淆液团结建设的寒热庞杂型UC具有优异的治疗作用。从以方测证的角度反观 ，大承气汤与TNBS/乙醇团结可乐成诱导寒热庞杂证UC的爆发 ，但上述模子研究中缺乏对“寒热庞杂证”的实验评价指标研究 ，包括详细的造模周期、造模剂量等参数。因此 ，本研究拟以寒热庞杂型UC的中医病证团结模子为研究工具 ，以相关客观寒/热指标和炎症指标为依据 ，在“虚寒证”基础上继续复制UC疾病模子 ，并对差别造模组的效果举行综合评价 ，优选寒热庞杂型UC大鼠模子的最佳造模计划 ，进而为相关动物模子研究提供实验依据。 分组与造模 48只大鼠顺应性饲养1周后 ，随机分为6组 ，包括空缺组、大承气汤组及4个模子组（模子1～4组） ，每组8只�？杖弊槿谈杪然迫芤海�9 g/L）灌胃（10 mL/kg）。 凭证文献要领制备大承气汤 ，即取酒大黄12 g、厚朴15 g（去皮）、炙枳实12 g、芒硝9 g ，加10倍量水将除酒大黄外的饮片浸泡30 min ，煎煮30 min后加入大黄继续煎煮10min ，过滤；药渣再加5倍量水煎煮30 min ，过滤 ，将两次药液合并后浓缩至1 g/mL（以大黄计）。本研究所用饮片均凭证《中华人民共和国药典（2020年版）：一部》举行质量检查 ，均为及格饮片。 造模第1阶段（第1～10天）：除空缺组给予氯化钠溶液（9 g/L）灌胃（10 mL/kg）外 ，其余各组给予大承气汤灌胃10 d(10 mL/kg）诱导虚寒证模子。大承气汤组10 d后禁食不禁水24 h ，麻醉后举行腹自动脉取血 ，并取材；模子1～4组10 d后行UC造模。 造模第2阶段（第11～18天）：实验第11天 ，空缺组大鼠正常进食、饮水 ，模子1～4组大鼠接纳异氟烷吸入麻醉 ，将聚乙烯管顶端涂适量石蜡油 ，插至大鼠结肠内距肛门口约8 cm处；随后模子1～4组大鼠划分给予TNBS(70 mg/kg）与体积分数50%乙醇（1∶1）混淆液、TNBS(50 mg/kg）与体积分数50%乙醇（1∶1）混淆液、TNBS(70 mg/kg）与体积分数25%乙醇（1∶1）混淆液、TNBS(50 mg/kg）与体积分数25%乙醇（1∶1）混淆液缓慢灌肠。灌肠完毕后夹住大鼠肛门 ，将大鼠头朝下悬挂5 min ，再平躺5 min ，至其自然苏醒后恢复自由进食、饮水。各组造模历程见图1。 在大承气汤诱导“虚寒证”模子的基础上 ，乙醇浓度对UC造模乐成与否有较大影响。经实验研究较量可知 ，接纳TNBS溶液（剂量70 mg/kg）与体积分数50%乙醇溶液按1∶1混匀制得的TNBS/乙醇混淆液的造模效果更优 ，可乐成建设寒热庞杂型UC大鼠模子。该模子以中医基础理论为支持 ，中医证候与经典UC要领相团结 ，获得的切合病证团结特点的寒热庞杂型UC模子 ，可为相关实验研究动物模子的建设提供参考 ，应用于中医药相关干预手段作用研究。值得关注的是 ，该病证团结动物模子模拟的是寒热庞杂型UC ，其病机是人体饮食不节、苦寒太过、伤及脾胃 ，使得脾虚不运、脾阳不升、气机失调 ，在该动物模子上举行药效评价时应加以区分。别的 ，临床实践中在疾病的生长历程中可能泛起证型上的相互转化 ，且中医证候的动物模子不易收罗“舌象、脉象”等体征信息及对病灶感受的问诊反响 ，病证团结UC动物模子仍需进一步的探索和完善。 Source: 上海中医药杂志. 2024, 58 (08) ，基于病证团结特点构建寒热庞杂型溃疡性结肠炎大鼠模子的实验研究 ，DOI：10.16305/j.1007-1334.2024.2311068
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