目的 探讨METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介导的 m6A(N6 甲基腺苷)修饰对氧化低密 度脂卵白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264. 7)焦亡的影响 。
要领 ox-LDL(50 μg / mL)诱导 RAW264. 7 细胞 24 h 后,对 METTL3 举行敲低或过表达,检测作育细胞 RNA m6A 甲基化水平,荧光定量 PCR 和 Western blot 法检测 METTL3 和细胞焦亡相关基因 NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、 Caspase-1 mRNA 和卵白表达水平,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测细胞殒命率,酶联免疫吸附法检测炎症细胞因 子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 和 IL-10 的含量 。
效果 ox-LDL 能够增进 RAW264. 7 巨噬细胞 METTL3 的表达和 RNA m6A 甲基化水平,同时也能增进炎症因子 IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α 的渗透(P<0. 05),降低 IL-10(P<0. 05)的表达 。 在 ox-LDL 诱导基础上,METTL3 过表达后,RNA m6A 甲基化水平升高,NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1 表 达显著增添,促炎细胞因子 IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18 水平升高,抗炎细胞因子 IL-10 水平降低,LDH 释放增添, METTL3 敲低后效果相反 。
结论 METTL3 介导的 m6A 修饰能够显著增进 ox-LDL 诱导的巨噬细胞焦亡和炎症 反应 。
阅读原文：METTL3介导的m6A修饰对ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡的影响.pdf
17312606166