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天下首个基因敲除体细胞克隆狗模子构建乐成

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克日 ,中国科学院广州生物医药与康健研究院与北京希诺谷生物科技有限公司、中国农业大学相助 ,将 CRISPR/Cas9 与体细胞核移植手艺相团结 ,乐成构建出天下首个基因敲除体细胞克隆狗模子。

狗是人类最早驯化的动物之一。千百年来 ,狗作为人类的同伴 ,被用于看家护院、狩猎、导盲、警用及救援等事情。狗在营养代谢、心理剖解等方面与人类极其相似 ,且发明狗有 200 多种遗传疾病与人类的遗传疾病相似 ,因此狗也是研究人体心理和疾病爆发气理的理想实验动物。CRISPR/Cas9 与体细胞核移植手艺的团结 ,使得构建更多模拟人类重大疾病的模子成为可能 ,这将为开发人类疾病新的治疗手段和药物提供新的实验动物模子 ,同时也将加速培育出更多含优遗传良性状狗的新品种。

研究团队选取 ApoE 基因用于构建心血管疾病模子 ,为动脉粥样硬化研究提供更有用的大动物模子。首先 ,与之前构建 MSTN 基因敲除狗的要领一样 ,通过在狗的受精卵胞质中注射 mRNA 对犬的 ApoE 基因举行编辑 ,最终乐成获得 2 只 ApoE 基因敲除狗 ,“苹果”(公犬)和“葫芦”(母犬)。虽然 2 只基因敲除狗在 ApoE 基因位点上都举行了编辑 ,但 2 只狗的基因编辑方法是纷歧样的 ,其中“葫芦”的编辑方法并未造成移码突变 ,不是理想的模子。

为解决 CRISPR/Cas9 受精卵胞质注射要领保存的基因编辑方法纷歧样的问题 ,研究职员接着举行了体细胞克隆的实验。ApoE 基因敲除犬“苹果”的耳部皮肤成纤维细胞作为核移植供体细胞举行体细胞克隆 ,移植代孕受体 4 只 ,其中 2 只乐成有身并临盆产下 3 只幼犬 ,划分取名为“龙龙”、“希希”和“诺诺”。这标记着我国成为继韩国之后第二个自力掌握犬体细胞克隆手艺的国家 ,同时也是天下首例基因敲除体细胞克隆犬的降生。将 CRISPR/Cas9 与体细胞克隆手艺相团结 ,可以短时间内获得大宗具有相同遗传配景的动物模子。通过这一手艺 ,乐成地在 6 个月内获得 3 只与“苹果”具有相同遗传信息的动脉粥样硬化模子狗。

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