TEL:17312606166（伞司理）
腾博会官网临床前大动物实验中心
17312606166
高血压（hypertension）影响全天下约10亿人，约占全球疾病肩负的4.5%。原发性高血压是一种由遗传、情形及行为因素配相助用的重大性疾病，占高血压患者的90%以上。高盐摄入是主要的情形因素之一。血压对盐摄入的反应具有显著的个体差别，Kawasaki等和Luft等基于此先后提出了“血压盐敏感性”。血压盐敏感性也是心血管疾病的一个自力危险因素。一样平常人群中血压盐敏感者约占20% ～ 30%，而原发性高血压人群中血压盐敏感者约占50% ～ 60%。因此，有用的治理盐敏感性高血压是提高公共康健的要害。胃泌素（Gastrin，Gast）是一种主要由G细胞渗透的肽激素，作用于其受体胆囊缩短素B受体（Cholecystokinin B Receptor，CCKBR）以镌汰肾的钠转运及肠道钠吸收。Gast在调理钠平衡和血压方面具有主要作用，已有研究发明小鼠全身缺乏Gast（Gast-/-）或仅在肠道缺乏Cckbr（Cckbr-/-）可镌汰小鼠钠渗透且小鼠血压升高。Gast在盐敏感性方面也很主要，由于低钠摄入的Gast小鼠血压正常，但在正� ；蚋吣粕闳胧被岱浩鸶哐�。全基因组关联研究（Genome-wide Association Studies，GWAS）批注，Gast和Cckbr的染色体位点与高血压相关。
动物实验效果的临床一致性是评价动物模子的主要指标。只管常用的近交系小鼠因遗传配景的一致性而普遍应用，但这种简单性限制了其模拟人类遗传配景多样性的能力。人类的基因组中总共有凌驾8800万个遗传变异（包括约8470万个单核苷酸多态性、360万个插入/缺失变异和约6万个结构变异），这种多样性是导致疾病表型差别的主要缘故原由。例如，在差别种族间银屑病的临床体现差别以及血管主要素转化酶2（Angiotensin Converting Enzyme 2，ACE2）的DNA多态性与新型冠状病毒肺炎（Corona Virus Disease 2019，COVID-19）的易感性和严重水平相关。为了战胜这一限制，国际重大性状同盟（Complex Trait Consortium，CTC）提出建设遗传多样性小鼠资源。选定8个品系的小鼠（A/J、129S1Sv/ImJ、NZO/H1LtJ、NOD/ShiLtJ、C57BL/6J、PWK/PhJ、WSB/EiJ、CAST/EiJ）作为原始亲本小鼠。其中前5个品系是实验室常用的近交系小鼠，后3个是野生型小鼠，这8个品系的小鼠笼罩了90%小鼠的遗传变异。这8个品系相互重组杂交3代，获得F3代杂交小鼠，此后将F3代杂交小鼠举行20代以上的近交，获得一系列的遗传多样性近交品系。
高血压的爆发是一个重大的历程，涉及多种遗传和情形因素及其相互作用，其潜在的发病机制包括肾素-血管主要素-醛固酮系统（Research Analyst Assessment Specialist，RAAS）、醛固酮依赖性和醛固酮非依赖性盐皮质激素受体（Mineralocorticoid Receptor，MR）信号通路。这些机制通过激活肾中的盐皮质激素受体，增进Na+/K+-ATP酶的活性，进而增添肾对Na的重吸收，导致血压升高。相反，胃泌素能够降低Na+/K+-ATP酶的活性和抑制上皮钠通道（Epithelial Sodium Channel，ENaC）的活性，镌汰Na+的重吸收。本研究中使用的Cckbr基因敲除小鼠能够部分模拟MR信号通路对高血压的影响，并使用携带36 M单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNPs）的协同重组近交系小鼠，增添了高血压小鼠模子的遗传多样性，使其表型更靠近临床体现。构建遗传多样性高血压小鼠模子在血压表型、病理特征以及基因表达上展现出显著的品系间差别，类似于人类高血压患者之间的差别，从而有用地模拟了遗传异质性对疾病表型的影响。这些发明强调了使用遗传多样性高的动物模子在高血压研究中的主要性，为明确疾病的遗传基础和开发新的治疗战略提供了名贵资源。
实验动物选择：
亲本小鼠：13个品系的遗传多样性小鼠（A/J、FIM、GIG、POH、FEW、CIS、LOT、NUK、129、NOD、TOFU、PIPING、LAM）及Cckbr/-小鼠。13个品系的子代小鼠共390只，3 ～ 4月龄，体重约30 g, 牝牡各半，SPF级，均饲养于SPF屏障情形，温度23 ～ 26 ℃，湿度50% ～ 60%，昼夜明暗交替12 h/12 h，小鼠自由饮水采食。
小鼠的滋生战略与分组：
将13个品系的遗传多样性小鼠（A/J、FIM、GIG、POH、FEW、CIS、LOT、NUK、129、NOD、TOFU、PIPING、LAM）划分与Cckbr-/-小鼠杂交，获得基因型为Cckbr+/-的F1代小鼠，将其与同窝Cckbr+/-小鼠举行交配，此后将F2代小鼠凭证其基因型分为Cckbr+/ +组、Cckbr+/-组、Cckbr-/-组（每组10只，牝牡各半）,饲养至3 ～ 4月龄。其中，Cckbr+/-组和Cckbr-/-组为实验组，Cckbr+/+组为比照组。
将13个品系的遗传多样性小鼠划分与古板近交系盐敏感高血压小鼠模子杂交，发明差别品系的子代遗传多样性小鼠盐敏感性也是差别的，从中筛选了3个盐敏感品系，划分为A/J、LOT和FIM。钠水调理杂乱是盐敏感性高血压发病的主要诱因。通过对盐敏感LOT品系小鼠肾组织举行转录组测序剖析发明差别表达基因富集在卵白激酶C活化的G卵白偶联受体信号通路、细胞外区域和外泌体、胰岛素样生长因子（Insulin-Like Growth Factors, IGF）的团结、新陈代谢与昼夜节律调理等方面。已有研究发明，在响应的动物模子中靶向滋扰生物钟基因将影响肾钠渗透、BP和神经内渗透节律。
值得注重的是，与其他两个盐敏感品系差别，FIM品系小鼠Cckbr-/-组较Cckbr+ / +组缩短压显著降低（P< 0.05）。事实上，整个有机体并不是简朴的各部分的总和，而是一个新的整体，其中种种通路之间的相互作用是重大的，并有助于个体的反应。
近年来，人们越来越嫌疑古板近交系小鼠模子的适用性，部分缘故原由是使用这些模子的研究未能转化为乐成的治疗要领。然而，许多古板小鼠模子的配合特征是缺乏遗传多样性。无论使用哪种特定的小鼠品系，使用简单遗传配景都扫除了个体遗传多样性对疾病爆发和生长的影响。有研究批注临床前动物实验效果和临床实验效果一致性的差别是现在人类疾病研究及药物开发亟待解决的难题，特殊在受多基因影响的重大疾病的研究中。将极有可能无效无益的药物投入临床试验是一种资源的极大铺张，也是对临床试验患者的责任缺乏。盐敏感高血压在临床体现上保存个体差别，因此通过简单遗传配景的小鼠已无法建设有用的动物模子复制此类疾病。别的，通过对多个品系的小鼠举行抽样，人们可以更容易地对药物效应、差别条件下的行为差别和种种实验范式举行归纳综合性研究，而不是将自己的研究局限于C57BL/6或实验室古板近交系。在这里，研究职员将实验室古板近交系配景下的盐敏感高血压小鼠模子与遗传多样性小鼠品系举行杂交，作为一个新的临床前资源，旨在将富厚的遗传变异引入古板近交系盐敏感高血压小鼠模子中，以视察遗传多样性对盐敏感高血压的表型、分子机制等方面的影响，以及对干预或治疗步伐的反应。鉴于该实验设计的优点，以及越来越多的人意识到遗传配景影响种种重大性状。在未来，若是将遗传多样性纳入种种重大性疾病的临床前研究，将大大提高人类疾病小鼠模子的整体转化潜力。别的，本实验设计很可能普遍适用于以转基因的形式所构建的人类疾病小鼠模子，这样的模子将越发贴近真实天下的人群。在这些情形下，判断影响疾病爆发或严重水平的遗传因素，将有利于对疾病发病机制举行深入相识。总的来说，遗传多样性小鼠是一个名贵的资源，将更普遍地应用于种种重大性状疾病的研究中，成为人类发明疾病生物学机制，进一步熟悉疾病的“新工具”。
Source: 中国实验动物学报. 2024，32 （05），遗传多样性高血压小鼠模子的建设与基因转录调控剖析
| 上一篇：动物试验研究计划设计，详细应思量哪些因素？ | 下一篇：应用植入式缓释泵实现大鼠脑室给药的操作要领及其刷新 |
|
|
|
在线 手艺在线效劳时间：9:00-20:00 在腾博会官网，您对接的是手艺职员，而非客服传话！
电话
17312606166
微信
加微信获取对接
|
